稳转细胞系快速构建平台
一、技术平台介绍
我们开发了非病毒依赖的稳转细胞构建技术，可实现大片段（20kb）、多基因（3-5个基因）在细胞基因组上的稳定整合，较快30天获得稳转株，为客户提供性价比很高的稳转细胞构建服务, 不成功不收费。
二、业务特色
1. 无需包装病毒，降低实验成本、缩短实验周期；
2. 质粒转染效率高，无论是原代细胞还是常规细胞系，均可有效构建稳转细胞株。
3. 可一次性实现多个基因或大于10kb 片段的基因组插入和整合。
➢ 案例分享1 —— 大片段多基因共表达株构建
1. 质粒构建
质粒主要表达框如下，包含两个阅读框，两个功能基因A和B、两个报告基因GFP和BFP、一个抗性基因。质粒大小为15.8kb。
2.细胞筛选和鉴定
细胞经过抗生素筛选7d后，获得稳定细胞株。经鉴定，两套读码框均正确表达，BFP 和GFP 蛋白均可表达。
➢ 案例分享2 —— 复杂跨膜蛋白过表达株构建
1. 质粒构建如下
2. 细胞筛选鉴定
抗生素筛选后， 经过膜蛋白特异性抗体和GFP荧光双通道检测，筛选获得的细胞株成功稳定表达膜蛋白。
