稳转细胞构建技术服务
业务介绍
常规过表达细胞系构建需要依赖慢病毒转染的方法，该方法需要包装病毒，利用病毒将基因插入到目的细胞基因组。病毒包装对人员要就较高，需要技术熟练才能获得较高滴度的病毒。同时，病毒能携带的外源基因一般在4kb以下，基因大小受限，整体的实验周期相对较长。我们开发了非病毒依赖的稳转细胞构建技术，可实现大片段（20kb）、多基因（3-5个基因）在细胞基因组上的稳定整合，较快30天获得稳转株，可为客户提供性价比很高的过表达细胞构建服务, 不成功不收费。
技术流程
服务内容
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内容 |
描述 |
周期 |
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质粒构建 |
将要过表达的目的基因克隆到思格生物自主优化的质粒载体，测序验证。 |
1-2周 |
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细胞转染 |
将质粒转染目标细胞，转染方法可根据细胞类型选择化学转化或电转 |
1-2周 |
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细胞筛选 |
在细胞培养液中加入对应抗性的抗生素，加压培养筛选阳性克隆 |
2-3周 |
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检测鉴定 |
鉴定目的基因表达、细胞冻存保种。 |
1-2周 |
服务流程
我们的优势
✦ 无需包装病毒，质粒直接转染，快捷、省时
✦ 可一次性实现多个基因或10kb长度片段的插入
✦ 完善的筛选和检测体系
案例：本项目将TET-ON 调控元件、阻遏蛋白、诱导启动子、抗性基因、目标基因和报告GFP 基因共同构建到同一质粒载体上，转染肿瘤细胞并通过嘌呤霉素筛选，成功获得可诱导表达的稳转细胞。
订购信息
邮箱: techsupport@sgebio.com
电话: 400-185-1590